心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量检测系统性能评价 心肌肌钙蛋白

　　[摘要] 目的 评价心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量法检测心肌肌钙蛋白的性能。方法 应用心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量法测定血清cTnI水平，内容包括批内重复性、线性、准确度。结果 该法重复测定高、低值样本，CV＜10％；线性回归方程 y= 1.0352x-0.1792，r=0.998；与贝克曼ACCESS 2免疫分析系统全自动化学发光法的相关性分析，r=0.995。结论 心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量法检测cTnI用于诊断AMI具有操作简便、结果准确可靠、自动化程度高，且检测快速等优点，适合在临床工作中推广应用。
　　[关键词] 心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量法； 肌钙蛋白I； 全自动化学发光法
　　[中图分类号] R446.1[文献标识码] B[文章编号] 1005-0515（2011）-07-297-01
　　心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)测定方法的标准化、检测系统相对固定及质量控制措施的不断完善，2000年，欧洲心脏病学会(ESC)与美国心脏病学会(ACC)对AMI进行了重新定义，联合发表了新标准，确定cTnI为AMI诊断的首选心脏标志物，以cTnI取代CK-MB作为评价心肌坏死和诊断心肌梗死“金标准”[1]。定量的cTnI检测在临床上已经广泛应用，但在临床应用过程中发现各种方法之间差异很大，为了解该试剂盒在临床应用中的实际效果，本研究从批内重复性、线性及准确度等三个方面对该检测系统进行初步评价。
　　1 材料与方法
　　1.1 仪器与试剂 采用i-CHROMA_Reader的心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量检测系统及配套试剂，贝克曼ACCESS 2免疫分析系统及配套试剂，该参照系统检测心肌肌钙蛋白I近三月内室内质控稳定，最近一次参加卫生部室间质评PT成绩为100。比对前做好仪器维护及校准，检测期间室内质控在控。
　　1.2 标本来源 2011年在横县人民医院已确诊AMI患者共98例，其中男性63例，平均年龄61.5±5.6岁，女性36例，平均年龄63.2±3.8岁。抽取患者EDTA-K2抗凝血4ml，分离心分离血浆，将血浆分装为两管，一管用贝克曼ACCESS 2免疫分析系统测定，同时另一管用心肌肌钙蛋白免疫荧光干式定量系统检测，两组检测均在2h内完成。
　　1.3 测定方法 i-CHROMATM cTnI的检测原理是免疫荧光快速定量检测技术，干化学层析方法。即将血液样本与检测缓冲液进行混合，缓冲液中的荧光标记抗-cTnI抗体与血液中cTnI抗原结合形成抗原抗体复合物，当该复合物被加入到试剂盒的反应板上并通过毛细管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上被测试带上的抗-cTnI抗体所捕获。因此，血液样本中cTnI抗原越多，测试带上复合物聚积越多，荧光抗体信号强度反应了被捕获的cTnI数量，通过i-CHROMA Reader 免疫荧光分析仪检测血液样本中的cTnI浓度。
　　1.4 评价标准
　　1.4.1 试剂批内重复性评价：选取高、低值标本各1例，重复测定2O次，以变异系数CV%≤10%符合要求。
　　1.4.2 线性范围评价：选取低值和高值两份CRP血清，用本检测系统测定3次，得CRP均值分别为1.7ng/mL、15.6ng/mL，然后按照3:1、2:1、1:1、1:2、1:3，制备成不同浓度样本，将各混合样本测定2次，取测定平均值与理论值计算相关系数r，以r≥0.995为符合线性评价要求。
　　1.4.3 准确度评价：按照EP9-A2[2]文件的要求选取cTnI>1.6ng/mL的新鲜样本，连续测定5d, 每天测定8份样本, 总共测定40份。每天将所选取的样本分成2等份，一份用本检测系统检测，另一份用贝克曼ACCESS 2免疫分析系统（全自动化学发光法）测定，每份样本测定两次,第1次按照1→8的顺序，第2次按照8→1的顺序测定，所有测定在2h内测定完毕。对两个检测系统的检测结果进行相关性分析，以相关系数r≥0.975（或r2≥0.95）为符合要求。
　　1.5 统计学处理 应用Microsoft Office Excel 2003进行统计学处理。
　　2 结果
　　2.1 批内重复性 测定其中高值X=10.83，CV=8.9%、低值X=1.51，CV=8.5%。结果显示该法精密度较好，符合CV

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