门源县阴田乡牛流行热的调查

郭俊梅

门源县阴田乡畜牧兽医站,青海门源 810399

牛流行热也叫三日热或暂时热，是一种由牛流行热病毒感染引起急性热性传染病。牛流行热临床表现具有典型的突发性高热热点，牛流行热的主要传染源为病牛，该病的发生具有显著的周期性和季节性特征。平均每3～5年或6～8年流行一次，往往为小流行与大流行交替发生。一般情况每次大流行间隔着一次小流行，且地方性流行发病具有时间长、损失大特点。

1.1 样本采集

本文选取2016～2021年从青海省门源县阴天乡养牛场采集的牛血清1 200份病例作为研究对象。血清样本采集于全乡的养牛散户和几个中小型规模化养殖场。采集的牛血清样本均统一带回实验室，在同样的处理条件下完成检测。牛血清样本先在37 ℃的环境下静置30 min，再放置在4 ℃的环境下静置15 min，然后以3 000 r/min做血清离心分离。最后将分离好的血清放置在-20 ℃下保存，血清采用间接ELISA法检测前应提前放置在4 ℃的环境下待检[1]。

1.2 一般材料与仪器

1.2.1 检测试剂

检测试剂采用由中国农业科学院兰州兽医研究所诊断中心所提供的牛流行热病毒间接ELISA抗体检测试剂盒。

1.2.2 检测仪器

美国BIO-RAD公司的iMARK型酶标仪；
德国eppendorf公司的离心机及微量加样器。

1.3 检测方法

采用间接ELISA法进行检测，检测方法参考如下：①取10 µL待检血，将其余90 µL血清稀释液混合均匀，加入准备好的抗原ELISA反应板，放置在37 ℃的环境下30 min进行孵育；
②PBST洗涤3次，再加入1:100稀释酶标记二抗，同样放置在37 ℃的环境下30 min进行孵育；
③PBST洗涤3次，再加入底物TMB，对其采取遮光处理，同样放置在37 ℃的环境下进行反应；
④反应10 min后加入终止液；
⑤使用酶标仪读取OD450值。

1.4 判断标准

结果判断依据公式S/P＝（OD450样本-OD450阴性对照）/（OD450阳性对照-OD450阴性对照）的原理进行判断。依据公式计算出S/P值：若S/P≥0.3，则为阳性；
若S/P＜0.22，则为阴性；
若S/P值介于0.22～0.3，则为可疑病例。对于检出结果存在疑问的，可通过重复检测进行验证。若重复检测的结果S/P＜0.3，则为阴性；
若S/P≥0.3，则为阳性。

1.5 统计分析

对1 200份样本血清信息进行检测分析，并对检测结果采用综合分析、卡方检验（χ2）进行数据统计与分析。最后结合结果比对血清采样的场点，分析牛流行热的流行情况和感染率，分析不同场点间牛流行热的感染率差异情况，分析和讨论牛流行热的发生与流行条件，以及防治牛流行热的措施。

2.1 检测结果

采 用 间 接ELISA法 对1 200份 血 清 样 本 进行牛流行热病毒抗体检测分析。表1为阴田乡2016～2021牛流行热病毒抗体检测统计表。从表1中可以看出，本次调查统计结果显示阳性样本共计59份，检出阳性率4.92%。其中牛养殖散户病毒抗体阳性检出率为3.08%，规模化牛养殖场阳性检出率为1.83%。散户场点与中小型规模化场点牛流行热病毒抗体检出阳性率存在差异性，差异具有统计学意义（p＜0.05）。这从侧面反映出阴田乡散户养殖牛流行热感染率高于规模化养殖[2]。

表1 阴田乡2016～2021牛流行热病毒抗体检测统计表

2.2 空间分布分析

根据检测结果，门源县阴田乡的散户养牛场点和中小型规模化养牛场的牛流行热检出率存在差异，差异具有统计学意义（p＜0.05）。这从侧面反映出散户养牛点的牛流行热感染率高于中小型规模牛养殖场点。

阴田乡位于门源县东部，南部大部分地区为高山草甸类草场，北部则为平坦开阔的谷地。气候属高原冷温半湿润气候区，具有雨热同期，夏季炎热多雨，冬季寒冷干燥的特点。全年最高气温7 ℃，最低气温-18 ℃，年降水量为445 mm。整体来看，阴田乡牛群牛流行热的空间部分差异不大。本次研究所采集的牛血清样本中，各村均有检测阳性率。

2.3 种间分布分析

本次研究选取的样本包含奶牛、黄牛。表2为阴田乡2016～2021牛流行热奶牛、黄牛检出阳性率统计表。从表2中可以看出奶牛与黄牛的牛流行热病毒抗体阳性检出数量为24和35，奶牛与黄牛阳性检出率分别为2.00%、2.92%。奶牛与黄牛流行热病毒抗体检出阳性率存在差异，差异具有统计学意义（p＜0.05）。这反映出黄牛流行热感染率高于黄牛流行热感染率。

表2 阴田乡2016～2021牛流行热奶牛、黄牛检出阳性率统计表

牛流行热病毒是一种生命力强、传染力强的病毒。该病毒传播扩散迅速，短期内流行特征显著。该病毒的传播媒介为吸血昆虫。牛群一旦有牛发生感染，即可在短期内造成多牛发病，呈现地方流行或大流行趋势，部分疫区常常发生跳跃式流行或疫区与非疫区的地方性流行。牛感染牛流行热病毒后一般经过流行发病，虽然发病率高，但致死率相对较低。该病在临床表现最急性型、急性型、慢性型三种病症。其中以最急性型的死亡率最高，急性型、慢性型的致残率更高。最急性型、急性型临床表现突发高热、流泪、流泡沫样涎水、流鼻液，呼吸急迫，后期变僵硬，出现跛行，甚至于瘫痪。发病后体温40～43.5 ℃，最急性型体温可达42.5 ℃，急性型最高体温达41.7 ℃，慢性型最高体温达43.5 ℃。最高体温一般出现在发病后3 d，发病2～3 d后高热症状开始恢复。

在流行时间上，一般6～9月气温较高、降雨较多，且降雨较为集中的时段感染率最高。南方地区2～4月、8～9月多雨时段发生率较高，其中9月份大流行情况最为严重。在流行规律上，一般3～5年小流行一次，6～8年大流行一次。根据牛流行热病毒的传播媒介，高温多雨时段蚊虫大量繁殖，为牛流行热病毒的传播提供了良好的条件。因此，高温多雨的时段牛流行热的感染率最高。根据本文对阴田乡牛流行热的调查，阴田乡感染牛流行热的散户点和规模化养殖场存在一些相同的特征：①养殖场环境脏、乱、差，粪污处理随意；
②养殖场消毒不全面、不彻底；
③防疫免疫不及时；
④牛舍基础设施差，通风、采光条件差；
⑤养殖户缺乏防疫意识和专业系统的防疫知识，对牛流行热认识不足；
⑥治疗方法单一，治疗方式不当，过分依赖抗生素。这些特征从一定程度上反映了阴田乡牛流行热流行的原因。根据原因，预防牛流行热就需要养殖户加强对养殖场的环境管理、饲养管理。养殖户要及时清除牛舍粪污，做好全场的全面彻底消毒工作，保持牛舍牛场的干燥洁净。同时重视牛流行热活疫苗的免疫接种，按照规定的接种流程、接种时间和接种操作，在每年5月份做好疫苗接种预防工作。每头牛肌肉注射4 mL牛流行热活疫苗。在治疗上，建议采用中西药结合治疗，加强中药对症用药，重视活血化瘀，才能起到标本兼治的效果。

本文调查研究，散户养殖场点的感染率高于规模化养殖场点。黄牛、奶牛为主要的易感群体，其中黄牛的感染率高于奶牛。调查中感染牛流行热的牛养殖场点的相似特征说明牛流行热的流行与养殖管理和养殖人员的防疫准备有着紧密的关系。牛流行热作为一种热性急性传染病，具有感染快、扩散快、季节性流行的特征。此外，牛流行热具有典型的周期性流行特征。该病的小流行、大流行往往在新老疫区间隔发生。建议养殖户根据牛流行热病因及流行周期做好防疫准备，才能有效控制该病带来的养殖损失。

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