【郑州地区甜瓜白粉病菌生理小种鉴定】

　　摘 要： 采用孢子悬浮液喷雾法对国际公认的13个甜瓜白粉病生理小种鉴别寄主进行接种，根据抗感反应，初步确定Sphaerotheca fuliginea小种1为郑州地区甜瓜白粉病致病生理小种。
　　关键词： 郑州； 甜瓜； 白粉病； 生理小种； 鉴定
　　甜瓜白粉病可造成植株光合能力下降，引起植株早衰甚至死亡，严重影响甜瓜的产量和品质，并且其传播速度极快，一旦发生很难根治，已经成为危害世界甜瓜生产的重要病害之一[1]。当前甜瓜白粉病主要由Sphaerotheca fuliginea（单囊壳白粉菌）和 Erysiphe cichoracearum（二孢白粉菌）引起，并且S. fuliginea危害更为普遍[2]。甜瓜白粉病生理小种分化非常迅速，到目前为止，已被命名的S. fuliginea生理小种有11个，E. cichoracearum 生理小种有2个[3]。在苏丹[4] 和法国[5] S. fuliginea和E. cichoracearum 2种白粉菌均有发现。美国[6]、伊朗[7]和日本[8]只发现了S. fuliginea。我国还未在全国范围内对甜瓜白粉病生理小种分化进行监控。目前，仅在北京[9]、浙江[10]、海南[11]、新疆[12]、甘肃[13]、上海[14]进行了甜瓜白粉病生理小种的初步鉴定。笔者通过对郑州地区甜瓜白粉病生理小种进行鉴定，拟明确甜瓜白粉病致病菌种类及其生理小种，为甜瓜白粉病防治和白粉病抗性育种奠定基础。
　　1 材料与方法
　　1.1 供试材料
　　以国际公认的甜瓜白粉病生理小种鉴别寄主为试验材料，包括Iran-H、Topmark、Vedrantis、PMR 45、PMR 5、WMR 29、Edisto 47、PI 414723、MR-1、PI 124111、PI 124112、PMR 6、Nantais Oblong，共计13份[15]（表1），均由北京市农林科学院蔬菜研究中心提供。所有材料均在本课题组试验基地内进行自交纯化，为高代自交材料。甜瓜白粉病菌种为2012年5月从中国农业科学院郑州果树研究所中牟露地及大棚甜瓜基地内随机采集，混合而成。
　　1.2 试验方法
　　1.2.1 白粉病病原菌种类鉴定 用毛笔刷取白粉病新鲜孢子于载玻片上，滴1滴3% KOH溶液，然后在10×40倍的显微镜下观察有无分生孢子纤维状体。
　　1.2.2 白粉病生理小种鉴定 13个甜瓜白粉病生理小种鉴别寄主在中国农业科学院郑州果树研究所中牟试验基地大棚内随机种植，于成株期每处理接种20株，设3个重复。
　　将采集的病原菌用毛笔刷入含有5% 葡萄糖的蒸馏水中，滴2滴吐温20，混匀后用血球计数板计数，配成1.0×106个·mL-1的孢子悬浮液喷雾接种，以雾滴均匀布满叶片但不流失为宜。接种后保持28 ℃/20 ℃（昼温/夜温），空气相对湿度80%～85%。分别于接种后7 d和14 d进行抗病性调查。方法参考王建设等[16]的分级标准（以叶片上白粉菌覆盖率作为统计标准）：感病率为0的为免疫；感病率小于5% 的为高抗；感病率 5%～20% 的为中抗；感病率 21%～50% 的为中感；感病率大于50% 的为高感。调查结果见表1。
　　2 结果与分析
　　对采集到的白粉病病叶，取病原菌新生孢子，加3% KOH溶液，在10×40倍的显微镜下观察，其圆柱形分生孢子梗上无分枝，有2～4个隔膜，并且均能看到纤维状体，确定本试验所用白粉菌均为S. fuliginea。采用孢子悬浮液喷雾法将不同来源的白粉病病原菌接种到 13个甜瓜鉴别寄主上，接种后4 d感病材料即可见到少量白粉病病斑，接种后7 d病斑开始逐步扩展，接种后14 d已充分发病，具体发病情况见表2。
　　表2 13个甜瓜鉴别寄主对白粉病菌的抗感反应
　　[注] S表示感病； R表示抗病。
　　由表2可以看出，在13个鉴别寄主中，PMR 45、PMR 5、WMR 29、Edisto 47、PI 414723、MR-1、PI 124111、PI 124112、PMR 6均表现抗病，只有Iran-H、Topmark、Vedrantis、Nantais Oblong 表现感病，并且接种后7 d与接种后14 d发病情况是一致的。根据表1可知，Nantais Oblong感病说明郑州地区甜瓜白粉病病原菌不是E. cichoracearum，与镜鉴结论一致。 PMR45是否发病是区别S. fuliginea小种1和小种2的关键因素，PMR45表现为抗病是小种1，表现感病为小种2。据此初步确定，S. fuliginea小种1是造成郑州地区甜瓜白粉病的生理小种。
　　3 讨论与结论
　　明确甜瓜白粉病生理小种是进行甜瓜白粉病防治和白粉病抗性育种的基础。前人研究结果表明，北京、浙江、海南甜瓜白粉病优势生理小种为S. fuliginea小种2，新疆、甘肃为小种1。郑州地区甜瓜白粉病与新疆、甘肃为同一生理小种。美国、日本等国家长期对瓜类蔬菜白粉病菌的种类及生理小种在较大范围内乃至全国进行监控，而我国在这方面的工作做得还远远不够，今后有待加强。
　　国内外关于白粉病的接种方法很多，包括风媒接种、摩擦接种、干孢子直接接种、液滴接种、孢子悬浮液喷雾接种等多种方法。孢子悬浮液喷雾接种是当前应用较多的接种方法，并且已有研究表明，在孢子悬浮液中加入葡萄糖能够提高孢子的萌发率。这可能是由于葡萄糖改变了孢子周围的渗透压，降低了孢子破裂的几率，或者是增加了孢子的碳素营养，从而提高了接种的成功率。尽管国际上对甜瓜白粉病生理小种的鉴定有统一的鉴别寄主，但是病情分级标准仍不统一，在某种程度上影响了鉴定结果的可靠性，因此制定应用方便、鉴定结果可靠的病情分级标准很有必要。
　　参考文献
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