[气相色谱-质谱法对当归及其炮制品挥发油的指纹图谱和潜在标志物研究]气相色谱—质谱法
摘 要 建立了一种基于气相色谱�质谱技术(GC�MS)的化学指纹图谱, 以发现当归及其不同炮制品潜在标志物的方法。利用GC�MS获得当归及其不同炮制品挥发油化学指纹图谱, 对产生的75样本×259变量数据进行归一化、修正80%规则和数据缩放等方法预处理, 通过正交校正偏最小二乘法(OPLS)模式识别方法对样品进行模式识别, 根据模型的变量重要性因子(VIP)和非参数检验结果筛选出12个潜在标志物。经相关分析和结构鉴定, 其中11个化合物分别被鉴定为丁内酯、萜烯醇、6�丁基�1, 4环庚二烯、2�壬酮、6�十一烷酮、2�甲氧基苯酚、�δ��榄香烯、4,5,6,7�四甲基苯酞、Z�丁烯基酞内酯、亚油酸甲酯、1,7�异丙基�4�甲基�1,4,5,6,7,7a�六氢�2H�茚�2�酮。
关键词 中药材; 炮制; 化学指纹; 气相色谱�质谱联用; 当归; 标志物
1 引 言�
近年来, 中药化学指纹图谱已广泛应用于中药质量标准研究。涉及的方法包括:高效液相色谱指纹图谱��\�、气相色谱指纹图谱��\�、薄层色谱指纹图谱��\�、高速逆流色谱指纹图谱��\�、毛细管电泳指纹图谱��\�和红外光谱指纹图谱��\�等。这些方法以“识别指纹图谱”的表现形式控制中药饮片及复方的质量, 而建立在中药指纹图谱基础之上的大量化学数据中, 发现潜在的标志物对评价中药饮片质量是非常有意义的。�
当归为伞形科当归属植物当归(Angelica sinesis (Oliv.) Diels)的干燥根��\�, 主产于甘肃岷县、漳县、渭源、宕昌等地, 是甘肃的道地药材之一��\�。当归中含有内酯类、生物碱类、有机酸类或酚类以及中性挥发油等多种成分。在中医药临床中, 可对当归采用不同的炮制处理, 以发挥不同的疗效。当归常用炮制品有油当归、酒当归、土当归、当归炭等��\�。本研究以当归及其不同炮制品为例, 以气相色谱�质谱联用(GC�MS)为分析方法, 运用统计分析手段, 建立从化学指纹图谱中发现不同炮制品潜在标志物的方法。2 实验部分�
2.1 仪器、试剂与材料�
6890N/5973N型GC�MS气质联用仪(美国Aglient公司);挥发油提取器(5 mL�24#标准口, 天津市天玻玻璃仪器有限公司), DM内热式玻璃纤维电热套(山东省永兴仪器厂)。�
当归药材采自甘肃, 由甘肃农业大学动物医学院魏彦明教授鉴定为A.Sinensis (表1)。石油醚、乙醚、无水Na�2SO�4等均为分析纯, 实验用水为二次蒸馏水。炮制所用辅料黄酒、香油均购于当地超市;土粉由甘肃中医学院炮制教研室提供供炮制用辅料。�
2.2 当归不同炮制品的制备��\��
(1)酒当归 取当归片, 加黄酒拌匀, 稍闷, 待酒被吸尽后, 用文火炒至深黄色, 微具酒香气时, 取出放凉, 每100 kg当归, 用黄酒10 kg。(2)土当归 将土粉置锅内炒热, 倒入当归片, 微炒至当归片粘满细土时取出, 筛去土粉, 放凉即可, 每100 kg当归, 用土粉30 kg。(3)当归炭 取当归片, 置锅内, 用中火炒至当归外表焦黑色, 内部棕褐色, 略具焦气, 质枯脆时, 取出放凉。(4)油当归 取净当归片,加入3 %的香油拌匀, 闷润, 文火炒至色泽加深, 微显焦斑, 待显油润有香气时出锅, 晾凉。样品编号见表1。
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