【HPLC法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱的含量】 小儿清肺化痰颗粒

　　[摘要] 目的 为更好地控制产品质量，建立以高效液相色谱法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱含量的方法。 方法 采用Diamonsil TM C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾（20∶80，用磷酸调节pH值为2.7），流速1.0 mL/min，检测波长210 nm，柱温40℃。 结果 盐酸麻黄碱进样量为0.41～2.46 μg时线性关系良好，相关系数r = 0.999 8，平均加样回收率为98.97%，RSD = 0.90%（n = 6）。 结论 本法采用流动相溶解供试品，操作简便易行，无干扰，重现性好，适用于小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱含量的测定。
　　[关键词] 高效液相色谱；小儿化痰止咳冲剂；盐酸麻黄碱；含量
　　[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）03（a）-0055-02
　　
　　Determination of Ephedrine Hydrochloride in Xiao"er huatanzhike Granules by HPLC
　　CHEN Guixiang
　　Dongguan TCM Hospital in Guangdong Province, Dongguan 523000, China
　　[Abstract] Objective To establish an HPLC method for determination of ephedrine hydrochloride in Xiao"er huatanzhike Granules to control the quality of it better. Methods Used Diamonsil TM C18 Column (4.6 mm×250 mm, 5 μm); The mobile phase consisted of methanol - 0.01 mol/L potassium dihydrogen phosphate solution (20∶80, the pH was adjusted to 2.7 by H3PO4), the flow rate was 1 mL/min, the detection wavelength was 210 nm and column temperature was 40℃. Results The linear range of ephedrine hydrochloride was 0.41-2.46 μg and correlation coefficient was 0.999 8. The average recovery of sample was 98.97%, RSD = 0.90% (n = 6). Conclusion The method is simple accurate to use the mobile phase dissolved the tests. It can be used for content determination of ephedrine hydrochloride in Xiao"er huatanzhike Granules with a good reproducibility, and without interference.
　　[Key words] HPLC; Xiao"er huatanzhike Granules; Ephedrine hydrochloride; Determination
　　
　　小儿化痰止咳冲剂由桔梗流浸膏、桑白皮流浸膏、吐根酊、盐酸麻黄碱等制成[1]，为中西药复方制剂，具有�痰镇咳的作用，临床用于小儿肺热咳嗽、咳痰等症的治疗。化学药品盐酸麻黄碱为其主要成分，盐酸麻黄碱通过促使肾上腺素能神经末梢释放去甲肾上腺素而间接激动肾上腺素受体，舒张支气管，加强心肌收缩力，增加心输出量，使静脉回心血量充分，有较肾上腺素更强的兴奋中枢神经的作用，具有较强的药理活性，临床用作治疗支气管哮喘及低血压。现行药品标准[1]中对小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱仅作定性鉴别，缺乏含量控制。为保证产品的疗效，本实验采用高效液相色谱法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱含量，现报道如下：
　　1 实验仪器与试药
　　1.1 仪器
　　日本岛津公司LC-2010 A 高效液相色谱仪，NC-2000型色谱工作站（大连中北科学技术公司），SIL-10AF自动进样器（日本岛津）。FA1104N型电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司），日立U-3010型紫外分光光度仪（日本HITACHI公司），昆山舒美KQ-50E台式超声波清洗器（清洗频率为40 Hz，功率为50 W，昆山市超声仪器有限公司）。
　　1.2 试药
　　盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所生产，批号：171241-200303，供含量测定用）；小儿化痰止咳冲剂(处方：桔梗流浸膏10 mL，桑白皮流浸膏15 mL，吐根酊60 mL，盐酸麻黄碱0.375 g。广西亿康药业股份有限公司，国药准字Z45021752，批号：100801、100802、100803) ；缺盐酸麻黄碱阴性空白对照品（本院自制）；甲醇为色谱纯，水为超纯水；其他试剂均为分析纯。
　　2 方法与结果
　　2.1 色谱条件
　　采用Diamonsil TM C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相：甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾（20∶80，用磷酸调节pH值为2.7），流速1.0 mL/min，设定进样量为20 μL，检测波长为210 nm，柱温调为40℃；按照盐酸麻黄碱峰计算理论塔板数（＞3 000）。
　　2.2 对照品溶液的制备
　　称取10 mg盐酸麻黄碱对照品，放置于100 mL量瓶中，并加流动相溶解并稀释至刻度，充分摇匀，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀。制备成功的溶液中，要求每1毫升含盐酸麻黄碱10 μg。
　　2.3 供试品溶液的制备
　　取10袋样品，均匀研细，精密称取约5 g，准确称定，置于25 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至25 mL刻度，并经超声处理30 min后，取出冷却（达室温即可），然后称定质量，加流动相补足至刻度，摇匀后用0.45 μm微孔滤膜过滤，滤出的续滤液即供试品溶液。
　　2.4 阴性对照品溶液的制备
　　阴性对照品溶液由本院按照小儿化痰止咳冲剂的处方比例，自制缺盐酸麻黄碱的阴性空白样品。不含盐酸麻黄碱的阴性对照品溶液依照2.3项中供试品溶液的方法制备。
　　2.5 干扰实验
　　在对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液中分别吸取20 μL注入色谱仪，结果表明，阴性对照溶液在盐酸麻黄碱出峰位置处无吸收峰，说明处方中其他成分对盐酸麻黄碱含量的测定无干扰。
　　2.6 线性关系的考察
　　精密称取10.27 mg的盐酸麻黄碱对照品，放置于50 mL的量瓶中，取甲醇溶液将其溶解，再稀释至刻度，然后摇匀，精密量取溶解液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，依次放置于10 mL的量瓶中，再使用甲醇溶液稀释至刻度，充分摇匀。分别进样20 μL，读取色谱峰面积并作记录。以峰面积（Y）为纵坐标，盐酸麻黄碱进样量（X）为横坐标，进行线性回归分析，得回归方程为：Y = 5.16×107X + 3.54×105，r = 0.999 8，结果表明在进样量为0.41～2.46 μg范围内，线性关系良好。
　　2.7 精密度试验
　　精密吸取10 μL已制备好的对照品溶液，并重复进样6次，测定峰面积。结果显示精密度良好（RSD = 0.78%）。
　　2.8 重复性实验
　　准确称取同一批号（100801）样品6 份，按照2.3项下方法制备成供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样含量测定，结果供试品含盐酸麻黄碱分别为0.350、0.351、0.347、0.345、0.349和0.353 mg/g，结果表明本方法重现性良好（RSD = 0.93%）。
　　2.9 稳定性试验
　　取同一供试品溶液（批号：100801），分别于0、2、4、8、12， 24 h重复进样测定，计算样品含量。结果表明，24 h内供试品溶液稳定，对试验结果无影响（RSD = 0.80%）。
　　2.10 加样回收率试验
　　取已测定含量的样品（批号：100801，含量0.349 mg/g）6份，准确称定，分别精密加入一定量的盐酸麻黄碱对照品溶液，按供试品溶液制备项下操作，依法制备、进样，测定含量并计算回收率。平均回收率为98.97%，RSD = 0.90%，结果见表1。
　　2.11 样品含量测定
　　取3批次的样品，分别制备成供试品溶液，进样测定，计算盐酸麻黄碱含量，结果见表2。
　　3 讨论
　　盐酸麻黄碱为拟肾上腺素药[2]，是麻黄碱的盐酸盐，可用于支气管哮喘、百日咳、枯草热及其他过敏性疾病，大量或长期使用，可产生震颤、焦虑、失眠、头痛、心悸、心动过速等，因此临床上应慎重使用。小儿化痰止咳冲剂为儿科常用药，盐酸麻黄碱为其所含的一种化学成分，为保证临床用药安全，应该对冲剂中盐酸麻黄碱的含量进行严格控制。
　　取盐酸麻黄碱对照品适量，加流动相溶解，于200～400 nm波长范围内扫描，盐酸麻黄碱在210 nm波长附近处的吸收峰强度大，基线平直，同时参考相关文献报道在210 nm波长处测定盐酸麻黄碱的含量[3-4]，故选用210 nm波长作为实验检测波长。经反复试验并参考国内研究[5-7]，以甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾为流动相，结果表明盐酸麻黄碱与其他组分分离完全，方法简单，经济实用。
　　田静等[8]报道曾在碱性条件下，采用氯仿提取盐酸麻黄碱氯仿提取液，再用0.01 mol/L盐酸溶液提取，结果显示：样品在用氯仿提取的过程中乳化严重，操作困难，回收率低。本法采用流动相溶解供试品，直接超声处理，无需提取，操作简便易行，峰形好，无干扰，重现性好，可为控制小儿化痰止咳冲剂成药质量提供依据。
　　[参考文献]
　　[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品标准・中药成方制剂第9册[S]. 1994：24.
　　[2] 朱福秋，陈宗良. 高效液相色谱法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱的含量[J]. 时珍国医国药，2005，16（6）：492-493.
　　[3] 陆蕴，余菁. 高效液相色谱法测定复方盐酸麻黄碱滴眼液中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药房，2006，17（12）：939-940.
　　[4] 罗兴平，魏学冰，杨玲霞，等. 高效液相色谱法测定小儿化痰止咳颗粒中盐酸麻黄碱的含量[J]. 分析测试技术与仪器，2005，11（3）：200-202.
　　[5] 杨晓莉，吕卓. HPLC法测定咳喘舒片中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药品标准，2009，10（1）：52-54.
　　[6] 李巧如，李小川，张鹏. 高效液相色谱法测定小儿化痰止咳片中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药房，2006，17（22）：1732-1733.
　　[7] 张秀梅，袁如彩. HPLC法测定盐酸麻黄碱滴鼻液中盐酸麻黄素的含量[J]. 中国医药导报，2009，6（34）：43.
　　[8] 田静，许亚玲，陶金. HPLC 法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药事，2006，20（1）：53-54.
　　（收稿日期：2012-01-11）

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